Cys C沉默表达对非小细胞肺癌A549细胞侵袭、调亡的影响

作者：段松; 黄春^*

来源：中国煤炭工业医学杂志, 2021, 24(02): 127-131.

• 非小细胞肺癌
• 半胱氨酸蛋白酶抑制剂C
• 增殖
• 凋亡
• 侵袭

目的探讨沉默半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响。方法体外培养人NSCLC A549细胞,并以脂质体转染法分别将Cys C特异性siRNA(si-Cys C组)、si-NC(阴性对照组)及空脂质体(Blank组)转染A549细胞,并以RT-PCR和Western blot法检测转染效率;使用CCK-8实验、流式细胞术、Transwell等方法检测沉默Cys C表达对A549细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响;使用组织蛋白酶L荧光定量检测试剂盒检测组织蛋白酶L活性。结果转染后,si-Cys C组的Cys C miRNA和蛋白水平均显著下调(均P<0.05);CCK-8实验显示沉默Cys C后,与Blank组和si-NC组比较,si-Cys C组在48、72h时A549细胞增殖倍数显著增加(P<0.05);流式细胞术检测结果提示,与Blank组和si-NC组比较,si-Cys C组A549细胞凋亡水平显著下降(P<0.05);Transwell实验提示与Blank组和si-NC组比较,si-Cys C组细胞侵袭数明显增加(P<0.05);与Blank组和si-NC组比较,沉默Cys C表达后si-Cys C组A549细胞组织蛋白酶L活性显著增加(P<0.05);Blank组和si-NC组上述各指标比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论脂质体转染构建稳定低表达Cys C的A549细胞模型可靠,Cys C表达下调可以诱导A549细胞组织蛋白酶L水平升高,减少A549细胞凋亡,并促进其增殖和侵袭能力。

• 单位
  重庆大学