摘要
目的观察软坚护肝片含药血清对肝癌细胞迁移侵袭的抑制作用及其对细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用不同剂量软坚护肝片制备软坚护肝片含药血清,处理体外培养的人肝癌Huh7细胞株,噻唑蓝还原法(MTT)检测肝癌细胞的增殖,采用小室迁移穿模(Transwell)实验检测肝癌细胞的迁移、侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blot)、荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RTPCR)检测E-cadherm、Vimentin表达。结果软坚护肝片含药血清能显著抑制Huh7细胞增殖,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。转化生长因子-β1(TGF-β1)处理后,Huh7细胞迁移数目较对照组显著增加(P<0.01)。而低、高剂量软坚护肝片含药血清组较TGF-β1组显著降低(P<0.01)。TGF-β1处理后,E-cadherin蛋白及mRNA均较对照组显著降低,而软坚护肝片含药血清组E-cadherin蛋白及mRNA表达水平均较TGF-β1组升高。而TGF-β1处理后Vimentin蛋白及mRNA表达水平较对照组显著升高,而软坚护肝片含药血清能显著抑制Vimentin蛋白及mRNA表达。结论软坚护肝片含药血清能够显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肝癌细胞EMT是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。
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单位上海中医药大学附属曙光医院; 中国人民解放军第二军医大学; 广西医科大学第一附属医院