摘要
本试验旨在构建奶牛小肠上皮细胞氧化损伤模型,为研究氧化应激状态下的肠道养分吸收机制提供平台和基础。采用不同浓度的H2O2(0、50、100、200、400、800μmol/L)处理奶牛小肠上皮细胞不同时间(2、4、6 h),用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,氯化硝基四氮唑蓝(NBT)法测定细胞内活性氧(ROS)含量,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果表明:与对照组相比,200μmol/L H2O2作用奶牛小肠上皮细胞2 h的细胞存活率(64.03%)显著降低(P<0.05),细胞内ROS含量和培养液中LDH活性显著上升(P<0.05),细胞内SOD和GSH-Px活性均显著降低(P<0.05)。综上所述,200μmol/L H2O2作用奶牛小肠上皮细胞2 h,可构建奶牛小肠上皮细胞氧化损伤模型。
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单位动物科技学院; 浙江农林大学