利用siRNA干扰MGMT基因表达的初步研究

作者：王芳; 周紫垣; 刘胜学; 曹佳

来源：第三军医大学学报, 2006, (11): 1138-1140.

• O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因
• RNA干扰
• HelaS3

目的采用RNA干扰(RNA interference,RNA i)技术,通过构建人O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-meth-ylguan ine-DNA methyltransferase gene,MGMT)基因的特异性siRNA(small interfere RNA)真核表达载体,体外观察对人MGMT(hMGMT)基因的沉默作用。方法将合成的发卡样特异性hMGMT RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体并转染体外HelaS3细胞株,以半定量RT-PCR法检测hMGMT mRNA的表达水平,以MTT法检测转染后HelaS3细胞对BCNU的敏感性变化。结果成功构建MGMT siRNA的真核表达载体;所构建的载体能够特异性降低hMGMT mRNA的表达水平,转染后HelaS3细胞对BCNU的敏感性增加。结论该RNA干扰真核表达载体可以特异性干扰hMGMT基因的表达。

• 单位
  第三军医大学