miR-21在TGF-β1引起的肝卵圆细胞上皮间质转化中的作用

作者：高胜强; 喻凯; 陈潇; 罗建生

来源：肝胆胰外科杂志, 2018, 30(02): 142-147.

• microRNA-21
• 肝卵圆细胞
• 转化生长因子β1
• 上皮-间质转化

目的探讨microRNA-21(miR-21)在TGF-β1引起的肝卵圆细胞(hepatic oval cell,HOC)上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法体外培养大鼠肝卵圆细胞,用10 ng/mL TGF-β1刺激HOC 1、3、5、7 d后,Western blotting检测EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)表达情况;用10 ng/mL TGF-β1刺激HOC 5 d后,实时荧光定量PCR检测miR-21的表达情况;分别用miR-21增强和抑制慢病毒转染HOC构建稳定的细胞株,PCR检测miR-21的表达情况;接着用TGF-β1刺激miR-21抑制慢病毒转染的HOC 5 d,Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达;用miR-21增强慢病毒转染HOC后,Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。结果 TGF-β1刺激HOC 1、3、5、7 d后,E-cadherin逐渐减低,N-cadherin和Vimentin逐渐升高。TGF-β1刺激HOC 5 d后miR-21的表达增强了4.32倍。分别用增强和抑制慢病毒转染HOC后,miR-21的表达增强了3.82倍和抑制了0.22倍。下调miR-21表达后,TGF-β1致HOC的EMT作用减弱。miR-21过表达后,HOC发生了EMT。结论抑制miR-21的表达可以减少TGF-β1引起的HOC的EMT作用,从而减轻肝纤维化。

• 单位
  金华市中心医院