DNA聚合酶γ的提取、纯化和鉴定

作者：张颖慧; 林菊生; 李岩; 高琳琳; 王晓燕

来源：世界华人消化杂志, 2007, 15(35): 3715-3721.

DOI：10.3969/j.issn.1009-3079.2007.35.009

• 人宫颈癌细胞
• DNA聚合酶γ
• 线粒体
• 离子交换层析

目的:提取并纯化人宫颈癌细胞(HeLa)的线粒体DNA聚合酶γ(DNA polymeraseγ,Pol γ),鉴定其纯度和活性.方法:运用离子交换层析等方法提取纯化HeLa细胞的线粒体Pol γ,并用Bradford法检测蛋白浓度.经SDS-PAGE检测蛋白纯度和相对分子量,Western blotting验证蛋白.用α-32PdTTP掺入法,液体闪烁计数器进行放射性测量以确定Polγ的活性.

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院