摘要
目的:探究Smad7修饰的骨髓间充质干细胞(Smad7-BMSCs)在体外抑制肝纤维化的潜在机制.方法:实验将大鼠肝星状细胞HSC-T6分为A组、B组,分别与Smad7-BMSCs和PBS共同培养.通过ELISA法检测各组细胞培养液中Col1和HA的含量; MTT法检测各组细胞增殖情况;培养72 h,收集细胞并提取总RNA和总蛋白,采用RT-PCR法检测细胞中Smad7、Smad3、MMP-1、TIMP-1、Col1 m RNA的表达; Western blot检测细胞中Smad7、Smad3、p-Smad3、MMP-1、TIMP-1、Col1蛋白的表达.结果:(1)A组细胞培养液中Col1和HA的含量显著下降(P <0. 05);(2)A组细胞增殖显著降低(P <0. 01);(3)Western和PCR结果显示,A组细胞中Smad7、MMP-1的蛋白和m RNA表达水平较B组显著升高(P <0. 01),而p-Smad3、TIMP-1及Col1蛋白和m RNA表达水平显著降低(P <0. 01).结论:Smad7修饰的骨髓间充质干细胞BMSCs可能通过降低肝星状细胞Smad3蛋白的磷酸化,从而影响MMP-1/TIMP-1平衡,促进星状细胞外基质ECM的降解而实现抗肝纤维化的作用.
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