miR-181d-5p对人结肠癌细胞凋亡的影响及机制

作者：柯东平; 朱金祥; 毛俊倩; 马佳; 李建辉; 马龙安^*

来源：贵州医科大学学报, 2019, 44(07): 814-820.

DOI：10.19367/j.cnki.1000-2707.2019.07.014

• 结肠肿瘤
• 细胞凋亡
• 微小RNA-181d-5p
• 黏附斑激酶

目的:探讨微小RNA-181d-5p(microRNAmiR-181d-5p)对人结肠癌细胞凋亡的影响及机制。方法:采用miR-181d-5p抑制物转染人结肠癌细胞系HCT116细胞,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Real-time PCR和Western blot技术检测细胞miR-181d-5p、第10染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)、黏附斑激酶(FAK)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、半胱天冬蛋白酶3 (Caspase-3) mRNA和PTEN、FAK、p-FAK、Bcl-2、激活型Caspase-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达,Targetscan软件在线预测及双荧光素酶实验分析miR-181d-5p和PTEN的调控关系。结果:与阴性对照组比较,miR-181d-5p抑制物组miR-181d-5p mRNA表达明显下调(P<0.01),凋亡细胞明显增加(P<0.01),PTEN mRNA表达水平明显上调(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达水平明显下调(P<0.01),PTEN、cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01),p-FAK、Bcl-2蛋白表达水平显著下调(P<0.01),其余各组之间差异均无统计学意义(P>0.05);Targetscan软件预测显示PTEN基因3’UTR含有miR-181d-5p的结合位点,双荧光素酶结果显示与突变型PTEN 3’UTR联合miR-181d-5p模拟物组相比,野生型PTEN3’UTR联合miR-181d-5p模拟物组荧光素酶活性明显降低,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论:miR-181d-5p可通过靶向调控PTEN抑制人结肠癌细胞凋亡,可成为结肠癌临床分子靶向治疗的潜在靶点。

• 单位
  陕西省人民医院; 陕西省肿瘤医院