敲低同源盒A6(HOXA6)抑制HCT116细胞增殖、迁移和侵袭

作者：吴莎莎; 姜政

来源：重庆医科大学学报, 2018, 43(05): 692-697.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.001684

• 同源盒A6
• 结直肠癌
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的:探讨抑制同源盒A6(homeobox A6,HOXA6)的表达对HCT116结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:构建重组干扰质粒(shRNA1,2,3,4-HOXA6)和阴性对照质粒(shRNA-NC),脂质体转染,荧光显微镜、RT-PCR和Western blot检测转染效率和表达情况。CCK-8法和克隆形成检测增殖,Transwell检测迁移和侵袭。Western blot检测E-cadherin、Ncadherin、Vimentin蛋白表达。结果:荧光显微镜显示各组转染效率均为30%左右;RT-PCR和Western blot结果显示各干扰组HOXA6 m RNA(P=0.003)和蛋白(P=0.000)的表达均低于shRNA-NC组,其中shRNA1-HOXA6组最低(P=0.000)。CCK-8结果显示shRNA1-HOXA6组的吸光度值明显低于shRNA-NC组(P=0.005);克隆形成结果显示shRNA1-HOXA6组(132±45)克隆形成数较shRNA-NC组(353±45)明显减少(P=0.004);Transwell迁移和侵袭实验显示shRNA1-HOXA6组[(134±28)、(60±4)]穿出细胞数较shRNA-NC组[(276±94)、(168±50)]明显减少(P=0.025、P=0.008)。Western blot实验显示shRNA1-HOXA6组E-cadherin(0.490±0.025)的表达较shRNA-NC组(0.326±0.032)明显升高(P=0.003),而N-cadherin(0.112±0.016)和Vimentin(0.886±0.033)较shRNA-NC组[(0.147±0.013)、(1.159±0.040)]明显降低(P=0.037、P=0.001)。结论:敲低HOXA6表达能显著抑制结直肠癌HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院