H5N1禽流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

作者：张坤; 黄伟; 李刚

来源：生物技术通讯, 2009, (02): 217-220.

• H5N1禽流感病毒
• 环介导等温扩增
• 条件优化 H5N1 avian influenza A virus
• loop-mediated isothermal amplification
• condition optimization

目的:建立H5N1禽流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。方法:从GenBank中获得H5N1禽流感病毒血凝素(HA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用PrimerExplorerV3软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物、内引物和环引物,同时以所克隆的阳性质粒为模板,对试验中的几个重要参数进行优化。结果:LAMP检测方法对H5N1禽流感病毒的灵敏度达到4～6个拷贝,其引物对于H1、H9亚型禽流感病毒和新城疫病毒无非特异性扩增,表现出良好的H5亚型特异性。结论:建立的H5N1禽流感病毒环介导等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,为快...

• 单位
  西南大学; 动物科技学院; 动物营养学国家重点实验室; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所