摘要
目的 初步探讨在日本血吸虫感染小鼠脾脏中,多核型髓源抑制细胞(PMN-MDSC)比例、功能及脾组织病理学的动态变化。皮感染日本血吸虫尾蚴(20±1)条/鼠。感染后4、 6、 8周各组随机取6只小鼠取脾,称重并计算脾系数。固定、切片后,苏木精-伊红染色(HE)镜下观察脾组织病理变化。制备脾单细胞悬液,流式细胞术检测PMNMDSC在脾淋巴细胞比例的动态变化。荧光定量PCR检测脾组织及脾PMN-MDSC相关炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、 S100钙结合蛋白A8 (S100A8)、 S100A9、细胞功能因子精氨酸酶1 (Arg1)、一氧化氮合酶(i NOS)、血红素结合膜糖蛋白91 (gp91)、转化生长因子-β (TGF-β)和IL-10的mRNA相对表达水平。采用SPSS 22.0统计学软件进行统计分析,组间比较采用独立样本t检验和ANOVA分析。结果感染后4、 6、 8周,小鼠脾质量分别为(179±10.19)、(350.3±16.84)、(414.3±18.98) mg,脾系数分别为(0.93±0.03)%、(1.97±0.10)%、(2.31±0.08)%,均高于对照组的(108.2±9.93) mg、(0.51±0.04)%(F=101.3、 143.7, P <0.01)。切片脾组织HE染色镜下观察结果显示,和对照组相比,感染后4~6周,炎性细胞逐渐增加,脾淋巴滤泡减少,生发中心减少甚至消失;感染后6~8周,炎性细胞逐渐减少,脾脏淋巴滤泡、生发中心结构逐渐增生。感染后4、 6、 8周,脾PMN-MDSCs比例分别为(1.53±0.16)%、(28.40±2.35)%和(38.67±1.94)%,高于对照组的(0.80±0.10)%(F=326.5, P <0.01)。感染后6周,荧光定量PCR结果显示,脾组织中IL-6、 S100A8、 S100A9、gp91、 Arg1、 i NOS、 IL-10和TGF-β基因的mRNA相对表达水平分别为2.74±0.25、 51.4±1.25、 39.20±2.83、2.15±0.08、 2.33±0.39、 1.57±0.08、 2.20±0.39和1.44±0.05,均高于对照组的1.05±0.10、 1.01±0.11、1.02±0.07、 1.04±0.09、 1.01±0.06、 1.00±0.05、 0.98±0.20和1.00±0.04 (t=6.367、 40.07、 13.50、 9.311、3.315、 5.642、 2.764、 6.914, P <0.05或P <0.01);脾PMN-MDSC中i NOS因子的m RNA相对表达水平高于对照组(t=0.6.134, P <0.01)。IL-10因子mRNA相对表达水平与对照组相比,差异无统计学意义(t=1.176, P>0.05)。感染后8周,脾组织中IL-6、 S100A8、 S100A9、 Arg1、 i NOS和IL-10的mRNA相对表达水平均高于对照组(t=2.496、 5.145、 9.518、 3.938、 4.819、 2.251, P <0.05或P <0.01);脾PMN-MDSC中i NOS、 IL-10因子m RNA相对表达水平分别为32.12±2.30、 2.64±0.37,均显著高于感染后4周的1.08±0.01、 1.14±0.35,感染后6周的12.06±1.80、 1.50±0.36和对照组的1.02±0.13、 1.06±0.12 (F=100.6、 5.471, P <0.01)。结论日本血吸虫感染后4~6周,脾组织炎症反应强烈;感染后6~8周,PMN-MDSC抑制因子IL-10分泌显著增高,脾组织结构也逐步恢复。
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