H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶的表达及抗体制备

作者：杨振华; 陶攀; 周思榆; 吴叔文; 潘兹书

来源：武汉大学学报(理学版), 2007, (04): 481-484.

DOI：10.14188/j.1671-8836.2007.04.018

• 禽流感病毒
• H5N1亚型
• 神经氨酸酶
• 抗体 avian influenza virus
• H5N1 subtype
• neuraminidase
• antibody

以禽流感病毒A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)NA基因全长cDNA克隆pMD-NA为模板,PCR扩增第406位至第1 353位基因片段.克隆到pET-28a表达载体,构建重组质粒pET-28/ΔNA,转化大肠杆菌,用异丙基β硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot分析证实,截短的NA重组蛋白获得高效表达.采用SDS-PAGE纯化重组蛋白,免疫家兔,制备特异性神经氨酸酶(NA)抗体.ELISA及间接免疫荧光检测结果显示,该抗体效价在1∶1×105以上,能与在大肠杆菌和Vero细胞中表达的NA蛋白产生特异性反应.纯化的NA重组蛋...

• 单位
  病毒学国家重点实验室; 生命科学学院; 武汉大学