E型沙眼衣原体MOMP基因重组质粒的构建与表达

作者:吕慧; 赵蔚明; 郑燕; 王红; 周亚滨; 齐眉; 栾怡; 程轶喆; 于晗; 杨熙; 于修平
来源:山东大学学报(医学版), 2005, 43(11): 985-988.
DOI:10.3969/j.issn.1671-7554.2005.11.001

摘要

目的:构建E型沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)基因重组真核表达质粒pVAX1-MOMP,为探索安全的E型CtDNA疫苗奠定基础。方法:根据Genebank中E型CtMOMP基因序列设计引物,用高保真PCR方法从E型Ct基因组DNA中扩增得到约1.1kb的MOMP片段,克隆至pcDNAII载体,测序后亚克隆至表达载体pVAX1,构建卡那霉素抗性真核重组表达质粒pVAX1-MOMP,并以重组质粒转染COS-1细胞进行表达,用Westernblotting方法鉴定表达产物。结果:从E型Ct基因组DNA中扩增出特异的MOMP基因片段,酶切鉴定及DNA序列测定证实pVAX1-MOMP重组质粒构...

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