慢性尼古丁干预抑制Kv1.5致小鼠肺动脉舒缩异常的机制研究

作者：秦小江; 许欣荣; 杜旭峰; 梁瑞峰; 白剑英; 侯晓敏; 施熠炜^*

来源：毒理学杂志, 2021, 35(06): 439-444.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2021.06.001

• 尼古丁
• 肺动脉
• Kv1.5
• 收缩
• 舒张

目的研究慢性尼古丁干预抑制Kv1.5致C57BL/6J小鼠肺动脉舒缩异常的机制。方法将40只4周龄的C57BL/6J小鼠随机分成4组,每组10只,分别为空白对照组(腹腔注射等量灭菌注射用水)、低浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.003 mg/kg·bw/d)、中浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.03 mg/kg·bw/d)和高浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.3 mg/kg·bw/d),干预24周。利用四通道微血管张力测定仪测定各组小鼠离体肺动脉对氯化钾(KCl)和TXA2类似物(9,11-dideoxy-9α,11α-methanoepoxy prostaglandin F2α,U46619)的收缩反应,及对硝普钠(Sodium Nitroprusside, SNP)和乙酰胆碱(Acetylcholine, ACh)的舒张反应;使用原代培养的C57BL/6J小鼠肺动脉平滑肌细胞,利用α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)进行免疫荧光鉴定;采用鼠尾胶原收缩法检测各组肺动脉平滑肌细胞对血管紧张素II(Angiotensin II,AngII)的收缩反应;全细胞膜片钳记录各组肺动脉平滑肌细胞Kv电流;RT-PCR和Western blot检测各组肺动脉Kv1.5的mRNA和蛋白表达量。结果血管张力检测结果显示,与空白对照组相比较,尼古丁干预24周可浓度依赖性的增强C57BL/6J小鼠离体肺动脉对KCl和U46619的最大收缩反应,同时尼古丁可浓度依赖性的减弱C57BL/6J小鼠离体肺动脉对SNP和ACh的最大舒张反应,差异有统计学意义(P<0.05)。胶原收缩法结果显示,与空白对照组相比较,不同浓度尼古丁组肺动脉平滑肌细胞对AngII的收缩呈浓度依赖性的增强,差异有统计学意义(P<0.05)。膜片钳结果显示,与空白对照组相比较,不同浓度尼古丁组肺动脉平滑肌细胞Kv电流逐渐减小,其I-V曲线向右并向下移动。RT-PCR和Western blot结果显示,与空白对照组相比较,不同浓度尼古丁组肺动脉Kv1.5的mRNA和蛋白表达呈浓度依赖性的减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性尼古丁干预致C57BL/6J小鼠肺动脉舒缩功能异常,其机制可能与抑制Kv1.5有关。

• 单位
  山西医科大学; 基础医学院; 山西医科大学第一医院; 公共卫生学院