传染性法氏囊病病毒非结构蛋白VP5的原核表达及多克隆抗体的制备

作者：张宁; 高宏雷; 高玉龙; 李俊山; 冉多良; 王笑梅

来源：中国生物工程杂志, 2006, (10): 30-35.

DOI：10.13523/j.cb.20061006

• 传染性法氏囊病病毒
• 非结构蛋白
• VP5
• 克隆表达
• 多克隆抗体 Infectious bursal disease virus (IBDV) Non-structure protein VP5 Cloning and expression Polyclonal antibody

利用PCR技术,从传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx、Gt毒株中分别扩增出VP5基因,将其克隆到表达载体pET30a、pET28a中。经PCR、酶切和序列分析鉴定获得重组质粒命名为pET28a-GtVP5、pET30a-GxVP5。将pET30a-GxVP5、pET28a-GtVP5分别转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功表达了约24kDa的Gx-VP5及23kDa的Gt-VP5融合蛋白,它们都以包涵体形式存在。将Gx-VP5纯化后的蛋白免疫8周龄BALB/c雌鼠,ELISA分析表明制备的抗血清效价在1∶25600以上,Westernblot分析VP5表达产物能与抗6×HismA...

• 单位
  新疆农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室