范可尼贫血互补群B对丝裂霉素C诱导的293T细胞DNA损伤修复的研究

作者：岑璞; 陈斌; 江晨艳; 柴永川; 蒋刈; 石润杰^*

来源：中国耳鼻咽喉颅底外科杂志, 2022, 28(02): 50-55.

DOI：10.11798/j.issn.1007-1520.202221198

• 小耳畸形
• DNA损伤,修复
• 范可尼贫血互补群B
• GammaH2AX
• RAD51
• 丝裂霉素C

目的 研究丝裂霉素C诱导的DNA损伤的浓度和时间对293T细胞中范可尼贫血互补群B(FANCB),DNA损伤因子gammaH2AX,修复因子RAD51表达量的影响，探索FANCB在DNA损伤中的作用机理。方法 利用人293T细胞系作为研究载体，通过Western blot和qRT-PCR技术定量分析FANCB,gammaH2AX,RAD51在25μM丝裂霉素C浓度作用下，在1、3、5 h不同作用时间点评估FANCB,gammaH2AX,RAD51蛋白和基因表达水平差异；分析细胞在25、35、45、60μM丝裂霉素C浓度下作用3 h后gammaH2AX蛋白表达水平；siRNA敲低FANCB表达后FANCB、gammaH2AX和RAD51蛋白和基因表达检测。结果 相比对照组，在蛋白水平，gammaH2AX表达在1、3 h对比0 h差异具有统计学意义(P均<0.05),而5 h对比0 h差异无统计学意义(P=0.223);FANCB表达在1、3、5 h对比0 h差异均具有统计学意义(P均<0.05); RAD51表达在1、3、5 h对比0 h差异均具有统计学意义(P均<0.05)。在基因水平，FANCB在1、3、5 h和RAD51在1、3、5 h相比对照组均具有统计学意义(P均<0.05);gammaH2AX蛋白表达水平与MMC浓度无明显关系。相比对照组，siRNA敲低组FANCB蛋白和基因表达下降，gammaH2AX蛋白表达上升，RAD51蛋白和基因表达下降。结论 在丝裂霉素C造成的293T DNA损伤模型中，FANCB在同源重组DNA修复途径中对DNA损伤具有潜在的调控功能。

• 单位
  上海交通大学; 上海交通大学医学院附属第九人民医院