摘要
目的 探究京尼平交联兔脱细胞气管支架的生物相容性及软骨再生情况,为京尼平交联脱细胞气管支架应用于临床提供理论依据。方法 利用去污剂-酶联合法制备脱细胞气管支架,通过4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色比较原生气管与脱细胞气管的细胞含量,Masson三色染色比较原生气管、脱细胞气管和京尼平交联脱细胞气管的组织学结构完整情况。取9只成年新西兰大白兔,按随机数字表法分为自体气管移植组(阴性对照组)、同种异体气管移植组(阳性对照组)和京尼平交联脱细胞气管移植组(实验组,气管表面种植有自体骨髓间充质干细胞),每组3只。通过检测血细胞、Ⅱ型胶原含量比较3组气管原位移植术后的炎症反应和软骨细胞再生情况。结果 DAPI染色后光学显微镜下(×200)可见脱细胞7周期气管的细胞含量[(143.0±71.1)个/视野]较原生气管[(853.5±149.6)个/视野]明显降低,差异具有统计学意义(P<0.001);Masson三色染色结果显示,京尼平交联脱细胞气管的组织结构更完整。血细胞分析和Ⅱ型胶原检测结果显示,种植骨髓间充质干细胞的京尼平交联脱细胞气管原位移植后,排斥反应小,在相关生长因子的作用下可在体内转化为软骨细胞。结论 京尼平交联兔脱细胞气管支架联合干细胞移植可成功进行气管原位替代模型的构建,这为组织工程气管的研究提供了有力支撑。
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