白藜芦醇通过Sirtuin1激活足细胞Notch1信号

作者：谢可炜; 魏凯; 顾明颖; 向芃; 顾乐怡

来源：中华肾脏病杂志, 2015, 31(04): 296-302.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2015.04.010

• 足细胞
• 受体,Notchl
• Sirtuin 1
• γ-分泌酶

目的探索白藜芦醇是否影响足细胞中的Notch 1信号通路及其可能的机制。方法分别使用RNA干扰(RNAi)技术和盐酸多西环素(doxycycline,Dox)诱导野生型(WT)和可诱导的Sirtuin 1(SIRT1)短发夹RNA(shRNA)转基因(CAGGS)足细胞SIRT1表达下降,重组小鼠Notch信号的Delta配体4(Delta-likeligand 4,DLL4)诱导激活Notch1通路。实时荧光定量PCR法检测SIRT1、Notch1通路关键γ分泌酶mRNA及Notch1靶基因Hes1、Hey2的表达。Western印迹法检测足细胞内Notch1胞内段结构域(intracellular domain of Notch1,ICD1)、SIRT1、解聚素金属蛋白酶(ADAM)10以及γ分泌酶复合物Presenilin 1和Nicastrin的表达。结果白藜芦醇剂量依赖地诱导野生型小鼠足细胞Notch1信号胞内段ICD1表达以及下游产物Hes1和Hey2 mRNA表达增高。白藜芦醇可诱导Notch1蛋白水解酶γ分泌酶组分Nicastrin的mRNA和蛋白表达上升以及ADAM10蛋白的表达下降(P<0.05),而这些变化在使用SIRT1RNAi后均被减弱(P<0.05)。重组小鼠DLL4可以增加Notch1通路靶基因Hes1和Hey2的mRNA水平,同时增加细胞核内ICD1的表达,盐酸多西环素孵育CAGGS足细胞显著降低SIRT1 mRNA水平(P<0.05),48 h后SIRT1蛋白表达明显下降(P<0.05),并且显著减弱DLLA的作用(P<0.05)。结论白藜芦醇可以通过高表达分泌酶Nicastrin诱导足细胞中Notch1信号活化,SIRT1介导了白藜芦醇和DLLA诱导Notch1信号活化的作用。

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院; 新疆维吾尔自治区喀什地区第二人民医院