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摘要
萝卜硫素是一种具有抗氧化、防癌、抗癌等生物活性的异硫氰酸酯类化合物，但因产量低限制了其应用。黑芥子酶可水解硫代葡萄糖苷生成异硫氰酸酯类化合物。该研究首次在毕赤酵母中分别表达了源于西兰花的黑芥子酶BoTGG1和甘蓝蚜虫的黑芥子酶BMYR,结果重组BMYR活性更高，且宿主毕赤酵母X33比GS115、载体pPICZα比pPIC9 K更利于表达黑芥子酶。构建的重组菌株X33/pPICZα-BMYR在3 L发酵罐中高密度培养，酶活力达到0.64 U/mL,为摇瓶水平的8倍。在催化底物质量浓度3 g/L,反应时间60 min, pH 4.5,反应温度45℃的条件下，生成的萝卜硫素质量浓度达到1.21 g/L,对萝卜硫苷的摩尔转化率为99.6%,为目前萝卜硫素制备的最高水平。该研究为黑芥子酶的生产及萝卜硫素的制备提供了策略参考。
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单位生物工程学院; 工业生物技术教育部重点实验室; 江南大学
