RNA干扰bcl-2基因的筛选及对肝星状细胞生物活性的影响

作者：孙桦; 李光明; 虢灿杰; 刘博伟; 胡俊杰; 李定国

来源：胃肠病学和肝病学杂志, 2008, (09): 758-761.

• 小干扰RNA
• 肝星状细胞
• 肝纤维化 Small hairpin RNA
• Hepatic stellate cell
• Liver cirrhosis

目的研究小干扰RNA(shRNA)重组载体介导抑制大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)bcl-2基因的表达,初步观察其对HSC生物活性的影响。方法设计有小发夹结构的3条DNA序列构建重组质粒载体pGPU6-GFP,脂质体转染HSC-T6细胞株以荧光定量PCR和Western blot筛选鉴定,通过CCK-8法及AnnexinⅤ/PI双标记流式细胞术检测、观察其对HSC生长的影响。结果pGPU6-GFP-shRNA1、shRNA2均能抑制bcl-2 mRNA和蛋白表达(P<0.05),pGPU6-GFP-shRNA1转染HSC-T6株72 h后对bcl-2基因抑制...

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院