摘要
为防治龟类细菌性眼炎病,从患眼炎巴西龟Trachemys scriptaelegans (体质量约150. 0 g)眼内分泌液中分离获得1株革兰氏阴性细菌,编号为G0503菌株,通过细菌形态学观察、理化特性、16S r DNA克隆和测序,以及构建系统发育进化树分析等方法,对其进行了鉴定研究。结果表明:该分离菌与甘露糖、半乳糖、肌醇等反应为阳性,与赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶等反应为阴性;进一步采用PCR方法扩增其16S r DNA序列,将其亚克隆至p MD18-T载体中测序,获得片段大小为1500 bp,与模式菌株Providencia rettgeri DSM 4542 (AM040492. 1)序列一致性为99. 30%;构建系统发育树分析显示,该菌与Providencia rettgeri(JN644501. 1)自然聚为一支,最终判定G0503菌株为雷氏普罗威登斯菌Providencia rettgeri;药敏试验结果显示,该菌株对头孢哌酮、头孢噻肟、诺氟沙星、左氟沙星、氟苯尼考等药物敏感,对阿莫西林、氨苄西林、磺胺异恶唑、复方新诺明等耐药;用该分离菌人工回归感染巴西龟死亡率达40%,主要呈现眼睛肿大、黏液增多,停止摄食等特征,并且与自然发病龟临床症状一致;组织病理学观察显示,病龟出现眼睑上皮细胞减少、淋巴细胞浸润等病理变化。本研究中首次报道巴西龟眼炎病原的分离鉴定,对该病防治可提供一定的参考依据。
- 单位