NSCLC患者恶性胸水中H19下调miR-203对肺癌细胞侵袭能力的影响

作者:刘帅妹; 王妹; 杜雨轩; 程文亮; 李洁; 葛晓军*
来源:医学研究生学报, 2022, 35(10): 1069-1075.
DOI:10.16571/j.cnki.1008-8199.2022.10.012

摘要

目的 H19在非小细胞肺癌(NSCLC)的异常高表达是目前研究的热点。文中旨在探究NSCLC患者恶性胸水中H19的表达水平及其与miR-203的调控关系。方法 收集2019年6至2021年5月遵义医科大学第二附属医院检验科132例NSCLC胸水标本。根据H19的相对表达水平,将患者分为H19高表达组(肿瘤/对照≥1.5)和H19低表达组(肿瘤/对照<1.5),健康供者为对照组。根据miR-203的相对表达水平,将患者分为miR-203高表达组(肿瘤/对照≥2.0)和miR-203低表达组(肿瘤/对照≤2.0)。在萤光素酶检测分析中,健康供者为空白对照组,未加入miR-203激活剂和miR-203抑制剂为阴性对照组,加入miR-203激活剂为miR-203激活剂组,加入miR-203抑制剂为miR-203抑制剂组。在EMT标记蛋白的变化分析,未加入miR-203抑制剂和H19抑制剂为阴性组,加入miR-203抑制剂和H19抑制剂为miR-203抑制剂+H19抑制剂组,加入miR-203抑制剂为miR-203抑制剂组。采用Western blot检测细胞内蛋白表达;CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡等。结果 H19高表达组的生存时间[(59.22±20.97)个月]较H19低表达组[(85.70±13.12)个月]明显缩短(P<0.05),即H19高表达与NSCLC的预后不良相关。而miR-203高表达组生存时间[(64.15±25.89)个月]较miR-203低表达组生存时间[(55.44±26.65)个月]明显延长(P<0.05)。相关性分析发现,H19与miR-203呈负相关(r=-0.66,P<0.01)。与阴性对照组比较,miR-203抑制剂组能抑制上皮标志物CDH1的表达,并促进间质标志物SNAI1和Vimentin的表达(P<0.05)。与阴性对照组比较,miR-203抑制剂组和H19抑制剂组能促进上皮标志物CDH1的表达,且抑制间质标志物SNAI1和Vimentin的表达(P<0.05)。结论 H19的表达能负向调控miR-203的表达,抑制H19的表达降低NSCLC细胞的增殖、侵袭,H19是NSCLC的调控机制之一。

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