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摘要
旨在研究Nrf2/HO-1通路在乙脑病毒（Japanese encephalitis virus， JEV）感染引起神经细胞损伤中的作用机制，本试验建立Nrf2激动剂叔丁基对苯二酚（Tert-Butylhydroquinone，TBHQ）处理JEV感染的小鼠神经瘤母N2a细胞的体外感染模型。N2a细胞四种处理分别为空白DMEM对照组（Control）；JEV感染组（JEV）；TBHQ处理组（TBHQ）；JEV感染+TBHQ处理组（JEV+TBHQ）。不同处理后观察细胞病变，检测ROS水平及MDA、SOD、CAT含量变化，利用qPCR和WB技术检测Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白的表达，并通过免疫荧光法检测各组细胞Nrf2蛋白表达情况，以及炎性因子及病毒含量。结果显示，JEV感染N2a细胞后随着时间延长ROS水平逐渐升高，且在36 h ROS水平最高。JEV感染后36 h Nrf2、HO-1的mRNA均升高，炎性因子水平升高。JEV感染N2a细胞后细胞皱缩，胞膜破裂，ROS、MDA水平升高，SOD、CAT水平降低；用40 μmol·L-1 TBHQ处理6 h后减轻了细胞损伤，降低了ROS、MDA水平，提高了SOD、CAT活性。JEV和TBHQ均激活了Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白的表达，用JEV+TBHQ联合处理Nrf2/HO-1通路的相关蛋白表达水平明显升高，且免疫荧光法检测细胞内Nrf2入核现象明显，且TNF-α、IL-6的mRNA水平及病毒的含量下降。上述结果表明，TBHQ能够通过Nrf2/HO-1通路减轻JEV引起的细胞氧化应激及炎症水平。
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