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摘要
目的探究SRT1720抗老年大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)衰老的作用及其机制并建立一种可行的预处理方案。方法以CCK-8法检测细胞生存率,通过过氧化应激模型,确定SRT1720预处理方案。之后采用SRT1720预处理和溶剂DMSO预处理,以β-半乳糖苷酶染色法显示细胞衰老情况,荧光定量PCR法检测衰老相关的p16、p21 mRNA表达水平,Western blot法检测衰老相关的p16、p21蛋白表达水平。管腔形成试验分析预处理的细胞上清液重悬人脐静脉内皮细胞(HUVEC)管腔形成情况。采用活性氧检测试剂盒检测MSCs内活性氧类物质含量。免疫荧光法检测MSCs细胞内DNA损伤情况。结果最适宜的SRT1720预处理方案为1μM SRT1720预处理老年MSC 24h,在此条件下,细胞在氧化应激条件下生存率最高,48h后衰老相关的β-半乳糖苷酶染色阳性率明显下降,细胞衰老相关的p16、p21 mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞上清液促HUVEC管腔形成能力增强,细胞内活性氧类物质含量减少,DNA损伤反应减弱。结论 SRT1720预处理可通过减轻细胞内活性氧类物质的产生及DNA损伤而改善老年MSC衰老表型及旁分泌功能。
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