牙鲆头肾巨噬细胞的分离培养与鉴定

作者：王宣刚; 孔祥福; 王欣桐; 李恒顺; 刘金相; 王志刚; 于海洋^*

来源：渔业科学进展, 2021, 42(05): 55-61.

DOI：10.19663/j.issn2095-9869.20200402001

• 牙鲆
• 巨噬细胞
• 原代培养
• 鉴定

本研究使用密度梯度离心法从牙鲆(Paralichthys olivaceus)头肾中分离得到了巨噬细胞,通过差速贴壁法对获得的细胞进行纯化,后续经过优化培养条件和培养过程,采用L-15培养基(Gibco)、5%胎牛血清、1%青-链霉素、1%非必需氨基酸、30% L929细胞培养基在24℃、无CO2的条件下进行培养。显微镜观察及吉姆萨染色结果显示,贴壁细胞具备巨噬细胞形态特征,使用巨噬细胞特异性基因标记mpeg1基因对细胞进行鉴定,在分离得到的细胞中成功扩增出该基因。本研究为体外研究巨噬细胞功能、深入了解硬骨鱼先天性免疫奠定了基础。

• 单位
  中国海洋大学; 生命学院