烟草CAF1基因的克隆与原核优化表达

作者：钟杰; 佟硕秋; 贡献; 林宗梅; 孙元烽; 张问平; 郑娟; 吴拥军^*

来源：分子植物育种, 2019, 17(21): 6987-6992.

DOI：10.13271/j.mpb.017.006987

• 烟草
• CAF1
• 原核表达
• 生物信息学分析

CAF1基因在植物的发育和抗逆性方面起到特定的作用。本研究旨在通过对烟草中CAF1基因进行克隆与原核表达分析,为研究其代谢机制提供数据支持。我们从野生烟草中提取总RNA,通过RT-PCR克隆获得CAF1的cDNA序列,NCBI登录号为KJ003855,生物信息学分析表明,CAF1 ORF长为855 bp,编码285个氨基酸,亚细胞定位于细胞核,其编码的CAF1蛋白仅有1个高度保守结构域:CAF1 superfamily(16～284);构建p ET30a-CAF1原核表达载体,转化到E. coli BL21 (DE3)中,获得浓度为0.213 mg/mL、纯度90%,且与预期一致的28 kD蛋白质。目的蛋白的成功表达为进一步研究CAF1在抗病、抗虫功能提供理论参考和数据支持。

• 单位
  生命科学学院; 贵州大学