牛无浆体PCR检测方法的建立及应用

作者：陈宋琴; 葛晓敏; 李才善; 郑会珍; 韦丽婷; 张婷; 郭庆勇^*

来源：中国兽医科学, 2021, 51(07): 834-839.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0121

• 牛无浆体
• PCR
• 临床应用
• 系统进化

为建立快速、特异、敏感的牛无浆体(Anaplasma bovis)PCR检测方法及了解新疆部分地区牛无浆体感染情况,根据牛无浆体16S rRNA基因序列(MH255941.1)设计1对引物,建立了检测牛无浆体PCR方法,并进行特异性、敏感性、重复性试验、临床样品检测及系统进化分析。结果显示,所建立的方法能特异性地鉴别牛无浆体,与环形泰勒虫(Theileria annulata)、绵羊无浆体(A. ovis)、牛巴贝斯虫(Babesia bovis)、双芽巴贝斯虫(B. bigemina)基因组均无交叉反应,该方法检测下限可达到1.02×10-18g/μL,比文献报道的PCR敏感10倍(8.9×10-18g/μL);具有良好的重复性;对94份牛临床血液样品检测结果表明,牛无浆体的阳性率为54.3%(51/94),高于文献报道的PCR方法的检测结果 37.2%(35/94);系统进化树显示,三个地区的牛无浆体菌株都不在同一分支上。结论,成功构建了牛无浆体PCR快速检测方法,这为牛无浆体的快速诊断及流行病学调查奠定基础。

• 单位
  新疆农业大学