牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因真核表达载体的构建和体外表达

作者：张凤秋; 杨连甲; 吴织芬; 秦鸿雁; 臧晓霞

来源：牙体牙髓牙周病学杂志, 2004, (04): 190-193.

DOI：10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2004.04.005

• 牙龈卟啉菌
• 牙龈蛋白酶K
• 牙龈蛋白酶K催化结构域
• 基因疫苗

目的 :构建牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因的真核表达载体 ,并检测其在体外真核细胞中的表达情况。方法 :利用基因重组技术构建牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因重组质粒pcDNA3.1( + ) -KGPcd ,然后通过脂质体将 pcDNA3.1( + ) -KGPcd瞬时转染COS7细胞 ,以RT -PCR和间接免疫荧光法检测重组质粒的转录水平和蛋白表达情况。结果 :成功构建了牙龈蛋白酶K真核表达载体 ;转染的COS7细胞中可检测到目的蛋白的转录和表达。结论 :成功构建了 pcDNA3.1( + ) -KGPcd真核表达载体并在哺乳动物细胞中能够正确转录和表达 ,为下一步作为基因疫苗免疫动物提供了依据。

• 单位
  第四军医大学