摘要
从腐烂的角叉菜中筛选出卡拉胶酶高产菌株YDK-6,通过形态观察及16S rDNA序列分析对其进行鉴定,采用正交实验对其产酶条件进行了优化,并对其所产卡拉胶酶的酶学性质进行了研究。结果表明,菌株YDK-6为假单胞菌(Pseudomonas sp.);在葡萄糖加量为15 g·L-1、酵母粉加量为10 g·L-1、卡拉胶加量为2 g·L-1、NaNO3加量为2 g·L-1、NaCl加量为15 g·L-1、K2HPO4加量为1.00 g·L-1、MgSO4加量为0.05 g·L-1、FePO4加量为0.01 g·L-1、CaCl2加量为0.01 g·L-1、起始pH值为7.5的条件下,于28℃摇床培养72 h,所产卡拉胶酶的活力达到111.33 U·mL-1,是筛选培养条件下酶活的3.56倍;菌株YDK-6所产卡拉胶酶的最适反应pH值为8、最适反应温度为60℃,在30~70℃时,120 min内均能保持60%以上的酶活;Ca2+、Mg2+、Fe2+、Mn2+对菌株YDK-6所产卡拉胶酶活力有一定促进作用,其米氏常数为0.174 mg·mL-1、最大反应速率为0.63 mg·mL-1·min-1。
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单位生命科学学院; 烟台大学