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摘要
目的构建人A型流感病毒NP基因原核重组表达载体并在E.coli BL21(DE3)中表达。方法从流感患者咽分泌物中提取总RNA,设计特异性引物,经RT-PCR得到NP基因开放阅读框cDNA后定向克隆到原核表达载体pET28b(+),构建含目的基因的pET28b(+)-NP重组质粒,经酶切、PCR和测序正确后转化E.coli BL21(DE3),0.1mmol/LIPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果①成功构建了pET28b(+)-NP重组质粒;②在E.coli BL21(DE3)中表达了一分子量约55 kDa的融合蛋白,经Western blot鉴定正确。结论重...
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单位长沙市中心医院
