BHV-1gG~-/tk~-/GM-CSF~+重组病毒的构建及其免疫效果的评价

作者：纪素坤; 邓明亮; 费文涛; 胡长敏; 陈颖钰; 郭爱珍; 陈焕春

来源：中国奶牛, 2013, (17): 3-8.

• 牛传染性鼻气管炎
• 牛疱疹病毒Ⅰ型
• GM-CSF
• 重组病毒
• 基因工程疫苗

通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。将牛GM-CSF克隆到pcDNA3.1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克隆到pcDNA3.1载体中,得到转移载体pTK-GM-CSF。将亲本病毒BHV-1 gG-/TK-/EGFP+基因组与转移载体pTK-GM-CSF采用磷酸钙法共转染MDBK细胞,得到重组病毒BHV-1 gG-/TK-/GM-CSF+。并对重组病毒的生物学特性和对日本大耳白兔的免疫原性进行了评价。利用PCR和RT-PCR证实GM-CSF基因表达盒已正确插入重组病毒的tk基因位置,并具有转录活性。亲本株...

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室; 动物科技学院