奶山羊ACSL6基因克隆及表达调控分析

作者：程菲; 潘坛; 张飞; 曾鑫; 罗军; 李聪^*

来源：中国畜牧兽医, 2021, 48(07): 2291-2301.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2021.07.003

• 奶山羊
• ACSL6基因
• 克隆
• 生物信息分析
• RNA干扰

研究旨在获得西农萨能奶山羊长链脂酰CoA合成酶6 (long-chain acyl-CoA synthetase 6,ACSL6)基因CDS序列,初步探究其对奶山羊乳腺上皮细胞脂质代谢的影响。以西农萨能奶山羊原代乳腺上皮细胞为试验材料,对ACSL6基因进行扩增和克隆,并利用实时荧光定量PCR方法对ACSL6基因进行组织表达分析,针对ACSL6基因的碱基序列利用在线软件进行生物信息学分析,采用RNA干扰技术改变奶山羊乳腺上皮细胞中ACSL6基因mRNA的表达水平。结果显示,ACSL6基因CDS区全长为2 169 bp,编码722个氨基酸;生物信息学分析表明ACSL6蛋白为碱性不稳定蛋白。组织表达分析显示,ACSL6基因在奶山羊乳腺组织中高度表达,其次为脾脏。将设计合成的siRNA转染乳腺上皮细胞,发现干扰ACSL6基因的表达使脂质代谢相关基因乙酰辅酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase, ACC)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearyl-CoA dehydrogenase 1,SCD1)、脂肪酸转运蛋白36(cluster of differentiation 36,CD36)、固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory element binding proteins 1,SREBP1)的mRNA表达水平极显著下调(P<0.01)。本研究结果为从蛋白及个体水平上研究ACSL6基因对奶山羊乳腺脂质代谢的影响提供理论依据。

• 单位
  动物科技学院; 西北农林科技大学