UHPLC-MS分析人促红素产品中CHO宿主细胞蛋白残留

作者：于雷; 秦玺; 张晓夕; 史新昌; 李响; 周勇

来源：药物分析杂志, 2023, 43(08): 1402-1407.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2023.08.16

• 人促红素
• CHO细胞表达系统
• 宿主细胞蛋白
• 超高效液相色谱-质谱联用技术
• 中国仓鼠全蛋白库

目的:利用超高效液相色谱-质谱联用技术（UHPLC-MS）分析人促红素（human erythropoietin, hEPO）产品中CHO宿主细胞蛋白（host cell protein, HCP）残留。方法:将hEPO原液和蛋白标准品一起进行变性、还原烷基化、酶切处理；采用Accucore Vanquish C18色谱柱串联超高效液相色谱和Q ExactiveTM Plus组合型四极杆OrbitrapTM质谱仪对样品进行分离和检测；使用BioPharma Finder 4.1软件中的HCP工作流程进行定性及定量分析。结果:10种HCP在4批hEPO原液样品中均被检测到，且不同样品中HCP总量有较大差异，从25×10-6至约1 000×10-6;含量>50×10-6的HCP,CV值均<10%。结论:UHPLC-MS法可对CHO细胞表达的hEPO产品中HCP进行定性定量分析，不同来源hEPO样品中HCP种类和含量均有差异。

• 单位
  赛默飞世尔科技（中国）有限公司; 中国食品药品检定研究院