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摘要
目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)与磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K-AKT-mTOR)通路双重抑制对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)的作用机制。方法采用Western blot检测细胞中前列腺癌细胞(DU145和LNCaP)的细胞外信号调节激酶5(ERK5)、mTOR含量。应用RNA干扰(RNAi)技术建立基因降表达细胞模型,分别建立ERK5降表达、mTOR降表达、ERK5和mTOR同时降表达细胞模型。MTT法检测不同基因降表达对前列腺癌细胞的增殖的影响。比较CYP17A1在mTOR降表达DU145细胞和正常细胞中的表达。MTT法检测分别加入mTOR抑制剂(替西罗莫司)和CYP17A1抑制剂(阿比特龙)的DU145细胞的抑制率。采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定ERK5和mTOR在前列腺癌、前列腺增生和CRPC组织中的表达。结果 mTOR蛋白在DU145细胞中的表达显著高于LNCaP细胞(P <0. 05)。ERK5降表达组、mTOR降表达组、ERK5+mTOR降表达组的LNCaP细胞的增殖未受显著抑制(P> 0. 05)。mTOR降表达组、ERK5+mTOR降表达组的DU145细胞抑制率显著高于ERK5降表达组(P <0. 05)。CYP17A1在mTOR降表达DU145细胞中的表达显著低于正常DU145细胞,且呈剂量依赖(P <0. 05)。替西罗莫司1μmol/L+阿比特龙0. 5μmol/L组的DU145细胞抑制率显著高于单用替西罗莫司组和单用阿比特龙组(P <0. 05)。ERK5和mTOR在前列腺癌和CRPC组织中均高表达,mTOR在CRPC组中的表达水平显著高于前列腺增生组和前列腺癌组(P <0. 05)。结论 mTOR蛋白在DU145细胞中、CRPC组织中表达显著高于ERK5,mTOR降表达能显著抑制DU145细胞增殖。提示CRPC以PI3K-Akt-mTOR通路高表达为主,mTOR对DU145细胞的抑制作用与其对CYP17A1的抑制作用有关,mTOR联合CYP17A1的抑制作用优于mTOR或CYP17A1的单独抑制。
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