摘要
目的:分析整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因在食管癌组织表达情况及其与患者临床病理特征之间的关系,探讨其对食管癌细胞(KYSE-150)增殖、凋亡和裸鼠皮下移植瘤的影响。方法:选取2012年1月至2014年12月手术切除并经病理证实的75例食管鳞癌患者的癌及癌旁组织标本,利用组织芯片技术,用免疫组织化学染色方法检测食管癌组织和癌旁组织中ILK的表达情况;qPCR检测食管癌细胞系Eca109、TE-1、EC9706、KYSE-150中ILK的表达,选用ILK表达最高的KYSE-150执行后续细胞功能学研究。使用ILK干扰慢病毒感染KYSE-150细胞下调ILK的表达,qPCR和WB方法检测ILK基因敲降效率;MTT实验、克隆形成实验和FACS检测干扰ILK表达对KYSE-150细胞增殖能力和凋亡水平的影响;裸鼠皮下成瘤实验检测干扰ILK对移植瘤生长的影响。结果:食管癌组织中ILK阳性率高于癌旁组织(P<0.05),且ILK高表达与淋巴结转移有关联(P<0.05)。qPCR实验结果显示,感染shILK的KYSE-150细胞中ILK的mRNA表达明显受到抑制(P<0.05);WB结果显示shILK组ILK蛋白水平表达显著下调,以上结果提示ILK敲降成功。shILK组KYSE-150细胞的增殖能力、克隆形成数均显著低于shCtrl组(均P<0.05),但细胞凋亡率高于shCtrl组(P<0.05)。与NC组相比,KD组裸鼠肿瘤生长缓慢,肿瘤的重量及体积均偏小(均P<0.05)。结论:ESCC组织中ILK的表达高于癌旁组织,且ILK高表达与淋巴结转移有关联;抑制ILK基因可造成抑制食管癌细胞增殖能力降低,促进细胞凋亡,并抑制裸鼠成瘤能力。
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单位第一临床学院; 新疆医科大学第一附属医院; 新疆医科大学