摘要

目的研究大鼠骨髓来源的内皮祖细胞的分离培养和鉴定方法。方法纤维连接蛋白提前包被培养瓶和培养板中的盖玻片。密度梯度离心法分离SD大鼠骨髓单个核细胞,EGM-2完全培养基,贴壁法,37℃,5%CO2,饱和湿度的恒温培养箱中原代培养。部分培养瓶细胞消化后计数。其余培养瓶和培养板中盖玻片细胞继续培养,细胞近融合时传代,分别在第6、9、12和24天进行细胞鉴定。内皮祖细胞鉴定:免疫细胞化学的vWF和VEGFR-2染色;内吞DiI标记的乙酰低密度脂蛋白(DiI-AcLDL)和结合FITC标记的荆豆凝集素-1(FITC-UEA-1)的激光共聚焦显微镜观察。结果培养细胞的形态学改变:骨髓单个核细胞种植24h后...