摘要
目的:探讨含三重基序蛋白25(tripartite motif-containing protein 25, TRIM25)和胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 3,IGF2BP3)与人食管癌EC109细胞活力的关系。方法:将EC109细胞分为过表达TRIM25组、过表达IGF2BP3组、敲减TRIM25组和敲减IGF2BP3表达且过表达TRIM25组,用MTT法和CCK-8法测定EC109细胞的活力;检测过表达TRIM25对IGF2BP3稳定性的影响;用免疫共沉淀技术检测TRIM25和IGF2BP3之间的相互作用;对EC109细胞转染过表达TRIM25载体或空载体,用免疫沉淀技术检测IGF2BP3泛素化程度的差异。结果:过表达TRIM25时,EC109细胞的活力受到抑制;过表达IGF2BP3时,EC109细胞的活力受到促进;敲减IGF2BP3表达的同时过表达TRIM25,EC109细胞的活力与单纯敲减IGF2BP3表达组比较无明显变化;过表达TRIM25时IGF2BP3的表达量减少,但用蛋白酶体抑制剂MG132处理EC109细胞后IGF2BP3的表达量得以恢复;敲减TRIM25对EC109细胞的活力在第2、3和4天有明显的促进效应;此外TRIM25与IGF2BP3存在相互作用;与此同时,过表达TRIM25后,IGF2BP3的泛素化程度增加。结论:TRIM25泛素化IGF2BP3,使IGF2BP3被蛋白酶体降解,从而抑制食管癌细胞的活力。
-
单位重庆医科大学附属第一医院