摘要
目的:探讨白藜芦醇(Res)对热刺激诱导的小鼠心肌细胞(MCM)凋亡的保护作用。方法:复制热刺激诱导MCM凋亡模型。首先采用实时无标记细胞分析技术检测Res对MCM存活率的影响;然后采用Annexin V-FITC/7-AAD双染法检测不同浓度Res给药组对MCM凋亡率的影响。JC-1探针法检测线粒体膜电位,初步确证MCM凋亡依赖于线粒体凋亡途径。利用全自动荧光酶标仪检测荧光探针(Ac-LEHD)2-R110标记的Caspase-9相对表达量;利用流式细胞仪检测荧光探针TF2-DEVD-FMK标记的Caspase-3/7的相对表达量;Western Blot法检测Bax、Bcl-2、COXⅣ蛋白的表达;ELISA方法检测细胞色素C(Cyt-C)含量、比色法测定Cyt-C氧化酶活性。结果:与模型组比较,Res高剂量及中剂量组细胞凋亡率显著降低(P<0.05,P<0.01),各组均可显著改善线粒体膜电位(P<0.01),Res高剂量及低剂量组Cyt-C释放量显著降低(P<0.05,P<0.01),Res各组均可显著降低Caspase-9活性(P<0.01),Res高剂量组可显著降低Caspase-3/7活性(P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.01,P<0.05),Res干预后Cyt-C氧化酶活性均升高但差异无统计学意义。结论:Res通过抑制线粒体凋亡途径缓解热刺激诱导的MCM凋亡。
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