人脐静脉血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

作者：宋显晶; 杨萍; 刘斌; 姜峰

来源：中国实验诊断学, 2008, (04): 439-441.

• 脐静脉血
• 内皮祖细胞

目的体外分离、培养及鉴定人脐静脉血内皮祖细胞。方法密度梯度离心法分离培养人脐静脉血EPCs。、通过免疫荧光法观察内皮细胞吸收DiL-acLDL和FITC-UEA-I情况,流式细胞仪定量检测EPCs表面CD133、CD34和KDR抗原表达阳性率来鉴定EPCs。倒置显微镜下观察EPCs形态学变化,计数细胞并绘制生长曲线。结果培养细胞呈长梭形,接种2-4 d梭形形态细胞较少,为细胞生长的潜伏期;6-10 d贴壁梭形细胞逐渐增多,为对数增殖期;10-14 d细胞融合成集落样生长,梭形细胞明显增多,进入生长平台期。激光共聚焦显微镜鉴定DiL-acLDL、FITC-UEA-I双染阳性的细胞为正在分化的EPCs;流式细胞仪检测结果:细胞表达CD133、CD34和KDR抗原的阳性率分别为:7.3+2.71%、42.0+6.42%、89.3+10.45%。结论从人脐静脉血可分离、纯化、扩增培养出内皮祖细胞。

• 单位
  吉林大学第二医院; 长春市中心医院; 吉林大学中日联谊医院; 承德医学院附属医院