环磷酰胺对铁过载小鼠骨髓造血干细胞的影响

作者：徐艳军; 易甜甜; 徐肖肖; 裴夫瑜; 何岳林; 吴学东^*

来源：南方医科大学学报, 2020, 40(01): 110-117.

• 环磷酰胺
• 铁过载
• 动物模型
• 造血干细胞

目的研究环磷酰胺对铁过载小鼠骨髓造血干细胞的影响。方法建立铁过载小鼠模型,随机将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、低剂量组(0.25 g/kg)、中剂量组(0.5 g/kg)、高剂量组(1 g/kg)。模型组小鼠腹腔注射不同浓度及剂量的右旋糖酐铁,对照组小鼠注射磷酸缓冲盐溶液(PBS液)0.2 m L/次,观察体质量及肝脾、骨髓等脏器改变,检测血清铁蛋白水平;进一步选择中剂量组模型小鼠按不同时间点分组(D1,D2,D3,D4,D5,D6,D7,D14),连续2 d腹腔注射环磷酰胺(Cy)50 mg/kg,对照组小鼠注射PBS液0.2 mL/次,建立铁过载小鼠Cy预处理模型,流式细胞仪检测骨髓单个核细胞(BMMNCs)、造血干细胞(HSCs)细胞数目及其在细胞周期中的分布、骨髓微环境等变化情况。结果与对照组小鼠相比,铁过载组小鼠体质量明显降低、血清铁蛋白明显升高、肝脾明显增大、脏器铁沉积明显,差异具有统计学意义(P<0.05);铁过载组小鼠外周血未见明显改变;Cy小鼠外周血白细胞(WBC)数目、淋巴细胞百分率(YM%)第1～4天明显降低,第4天降至最低,差异具有统计学意义(P<0.05);铁过载小鼠BMNNCs、造血祖细胞(HPCs)数目未见明显改变,但HSCs、长期造血干细胞(LT-HSCs)数目减少,差异具有统计学意义(P<0.05);而Cy组HSCs数量变化第1天开始升高,第3天升至最高,差异有统计学意义(P<0.05);铁过载小鼠细胞周期分布未见明显改变;Cy组小鼠DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例在第1～3天明显减少,第3天降至最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过腹腔注射不同剂量的右旋糖酐铁,成功建立铁过载三级危险模型。研究显示铁沉积在骨髓并对骨髓长期造血干细胞造成损伤,但是未引起外周血血象的改变;Cy 50 mg/kg连续2 d使铁过载小鼠更多静息状态的HSC进入细胞周期,起到动员造血干细胞的作用,并且在第4天动员作用最大。

• 单位
  南方医科大学南方医院; 南方医科大学