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摘要
通过分析茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)处理对羟基红花黄色素A (hydroxysafflor yellow A,HSYA)生物合成相关基因表达影响及不同花色HSYA生物合成相关基因表达差异,为HSYA生物合成及调控提供参考。首先用0、50、100、200μmol·L-1的MeJA对离体培养的红花花冠进行处理,找出最适MeJA处理浓度,然后用100μmol·L-1MeJA处理红花,在处理后的0、3、6、12、24 h不同时间点采样,用高效液相色谱法对HSYA的含量进行定量分析,找出最佳处理时间;以100μmol·L-1MeJA处理6 h的红花花冠提取RNA,通过qRT-PCR对参与HSYA生物合成的关键基因进行定量分析,找出表达差异基因;用HPLC和qRT-PCR对不同花色红花品系的HSYA含量及其相关合成基因进行定量分析,找出差异基因。结果表明,不同浓度的MeJA处理均能够显著增加HSYA的积累,其中100μmol·L-1MeJA处理6 h后HSYA的含量达到最高峰。qRT-PCR结果显示, MeJA处理红花花冠能够显著提高HSYA合成关键基因PAL2、PAL4、4CL2、4CL4、4CL5、CHS3、CHS4和CHI2的转录水平。不同花色红花中HSYA含量不同,呈现红色>橙黄色>黄色>白色的趋势, qRT-PCR结果表明CHS1和CHI2在红色、橙黄色、黄色红花中的表达量明显高于白色。以上研究表明MeJA对HSYA合成的调控主要通过影响PAL2、PAL4、4CL2、4CL4、4CL5、CHS3、CHS4和CHI2的转录水平来实现; CHS1和CHI2的基因表达差异是不同花色红花HSYA含量不同的主要因素。
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