miR-34a-5p/PLCD3轴调控骨关节炎进展的机制

作者：应璞; 许岳; 路通; 薛燚; 缪逸鸣^*

来源：中国组织工程研究, 2023, 1-6.

• 骨关节炎
• 滑膜
• miR-34a-5p
• 磷脂酶Cδ3
• PLCD3
• 白细胞介素6
• 肿瘤坏死因子α

背景：目前已有针对miRNA/mRNA轴调节骨关节炎疾病进程的分子机制研究。先前生物信息学研究发现具有临床预测价值的mRNA(磷脂酶Cδ3:phospholipase C delta 3,PLCD3)及其靶向miRNA(miR-34a-5p)，尚缺实验验证其调控骨关节炎的具体作用及机制。目的：探讨miR-34a-5p/PLCD3轴对骨关节炎进展的调控作用及机制。方法：选择15例膝骨关节炎患者的滑膜为骨关节炎组，同时选择同期因创伤致髌骨骨折行内固定术的15例年轻患者的健康滑膜为对照组，Real-timePCR法检测滑膜中PLCD3及miR-34a-5p的表达。通过细胞转染的方法，将人滑膜关节炎成纤维细胞(humanfibroblastlikesynovial cells-osteoarthritis,HFLS-OA)进行处理，并分为miR-34a-5p模拟物组、pCDH-PLCD3组、miR-34a-5p模拟物+pCDH-PLCD3组、miR-34a-5p抑制剂组、si-PLCD3组、miR-34a-5p抑制剂+si-PLCD3组，通过Real-time PCR法检测PLCD3和miR-34a-5p表达的关系；通过CCK-8法、细胞划痕实验检测各组HFLS-OA细胞活力及细胞迁移的影响；使用Western Blot法检测凋亡标记蛋白表达水平；使用ELISA法检测炎症因子的表达。结果与结论：(1)PLCD3是miR-34a-5p的直接靶标，同时PLCD3和miR-34a-5p表达水平呈负相关。(2)PLCD3上调会促进HFLS-OA细胞的增殖并抑制细胞迁移，而miR-34a-5p上调会显著抑制HFLS-OA细胞的活性并增强细胞迁移；miR-34a-5p过表达使HFLS-OA细胞Casp3和Casp9蛋白水平显著升高，而PLCD3过表达则表现出相反趋势。(3)PLCD3过表达显著增加了HFLS-OA细胞白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的表达，而miR-34a-5p模拟物则表现出保护活性。(4)结果说明，miR-34a-5p/PLCD3轴可能通过调节滑膜细胞的炎症过程或凋亡来影响骨关节炎的进展。

• 单位
  南京中医药大学