慢病毒介导的CBS基因过表达对原代皮质神经元β淀粉样蛋白分泌的影响

作者：朱丽娟; 陈筱山; 何选丽; 文明; 晏勇

来源：世界科技研究与发展, 2014, 36(03): 286-290.

• 皮质神经元
• 胱硫醚β-合成酶
• 慢病毒
• β淀粉样蛋白

目的通过过表达手段上调胱硫醚β-合成酶(Cystathionine-β-synthase,CBS)在原代神经元细胞中的表达,观察其对原代神经元β淀粉样蛋白(Aβ)分泌的影响。方法使用过表达CBS慢病毒载体感染体外培养的原代皮质神经元,设定为慢病毒介导阳性(CBS)组、另设阴性对照慢病毒感染(NC)组、未经慢病毒感染(CON)组。采用实时荧光定量PCR检测CBS基因mRNA的表达,Western blot检测CBS蛋白的表达,采用Elisa检测Aβ40的表达水平。结果使用过表达CBS的慢病毒载体感染体外培养的神经元,实时荧光定量PCR检测其mRNA的表达上调明显升高,与NC组和CON组相比差异有统计学意义(P<0.01),Western blot结果显示蛋白表达升高与定量PCR一致,Elisa检测感染72小时后CBS组、NC组、CON组Aβ40的分泌分别为(182.19±24.52)ng/L、(411.90±12.43)ng/L、(390.41±54.53)ng/L,CBS组与NC组和CON组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒介导的CBS基因过表达可降低原代皮质神经元Aβ40的分泌。

• 单位
  神经内科; 重庆医科大学附属第一医院