连翘花器官生长阶段内参基因筛选与评估

作者：曹亚萍; 王勇飞; 贾孟君; 贺嘉欣; 张鑫瑞; 李政; 乔永刚; 宋芸^*

来源：山西农业科学, 2020, 48(03): 298-303.

• 连翘
• 花器官生长
• 实时荧光定量PCR
• 内参基因

为筛选连翘花器官生长阶段稳定表达的内参基因,选取12个(18S、60S、ACT7、EF1α、EF1αH、GAPDH、HIS、LIPL、RP、RPL17、TUB、UBQ)常用内参基因和7个(FS-1、FS-2、FS-3、FS-4、FS-5、FS-6、FS-7)新型基因,采用RT-qPCR技术及Ge Norm、Norm Finder软件分析这19个候选内参基因在长花柱和短花柱连翘花现蕾期、露冠期、初花期、盛花期、末花期的表达稳定性,并利用Excel进行综合评估。结果表明,单从Ct值推测60S变化范围小,且表达量较高,适合作为内参基因;Ge Norm分析得出,ACT7+HIS组合为最适内参基因;Norm Finder分析表明,FS-4基因表达最稳定。综合评价结果显示,可选用FS-4与HIS作为连翘花器官生长阶段的内参基因。

• 单位
  山西农业大学; 生命科学学院