PM2.5诱导大鼠肺组织miRNAs表达谱失调及相关信号通路变化研究

作者：潘柏如; 张海军; 王杨; 杨娟

来源：西部医学, 2022, 34(07): 985-990.

• 肺癌
• 细颗粒物
• MicroRNA
• Notch基因
• 大鼠

目的 探讨PM2.5诱导大鼠血清miRNAs表达谱失调及相关信号通路变化。方法 将40只6周龄雄性Wistar大鼠随机分为对照组和PM2.5干预组[低剂量组(2.5 mg/kg)、中剂量组(10 mg/kg)、高剂量组(20 mg/kg)],每组10只。麻醉满意后，PM2.5干预组大鼠分别经气管内滴注PM2.5混悬液2.5、10、20 mg/kg,对照组注射50μL生理盐水，每3 d一次，连续干预70 d。实验结束后处死大鼠，收集肺组织进行病理学检查，并进行miRNA的RNA-seq高通量测序。培养人支气管上皮细胞16 HBE,用100μg/mL浓度的PM2.5处理16 HBE细胞24～48 h,模拟慢性暴露。利用miR-296-5p inhibitor及其阴性对照转染16 HBE细胞12 h后，进行PM2.5干预。Western blot检测Notch信号通路的改变。结果 与对照组比较，PM2.5干预组大鼠肺组织差异表达miRNAs有67个，其中上调48个，下调的19个，表达量差异倍数高于5倍的有4个，即miR-296-5p、miR-27a、miR-182、miR-92a-1-p5,其中miR-296-5p上调了7.85倍，是表达差异最大的miRNA。与对照组比较，经PM2.5干预后，细胞中的Notch1蛋白、HES1蛋白表达量降低，Beclin1蛋白、cleaved-Caspase3蛋白表达量升高(P<0.05);与miRNA阴性对照组相比较，转染miR-296-5p inhibitor后，细胞中的Notch1蛋白，HES1蛋白、Beclin1蛋白的相对表达量均明显升高(P<0.05)。结论 暴露于PM2.5环境中，大鼠肺组织中miRNAs的表达谱发生了紊乱，以miR-296-5p的表达失衡最明显，且miR-296-5p的表达失衡可通过Notch信号通路发挥效应，影响肺上皮细胞功能。

• 单位
  达州市中心医院