摘要
目的建立一种实时荧光环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测动物源性成分的分析方法。方法根据鸡、鸭、牛、羊物种cytb、COX3、12S rRNA、cytb特异性基因分别设计LAMP引物,反应时加入荧光染料SYTO-9,在63℃条件下反应45min,通过实时检测荧光强度判断反应结果,并进行实时监测。结果实时荧光LAMP方法对鸡、鸭源性成分的检测灵敏度为1pg,对牛、羊源性成分的检测灵敏度为10pg。对熟肉制品中掺杂肉检测时,掺杂鸡肉、鸭肉、牛肉和羊肉的检出限为0.01%。结论该方法可用于快速检测肉制品中动物源性成分,具有操作简单、无需贵重仪器、反应过程可实时监控、灵敏度高和特异性强等优点,适合于基层监管部门的现场快速检测。
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单位长沙市食品药品检验所; 湖南省食品安全生产工程技术研究中心