岩生忍冬黄酮提取工艺优化及其抗炎镇痛、免疫增强和抑制细胞焦亡作用

作者：李聪聪; 汪露; 关奎奎; 刘群^*; 陈朝喜^*

来源：中国中药杂志, 2021, 46(22): 5877-5886.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20210722.701

• 岩生忍冬
• 抗炎镇痛
• 免疫增强
• 抗氧化
• 细胞焦亡
• cAMP-PKA信号通路

优化岩生忍冬黄酮提取工艺并初步探究其抗炎镇痛、免疫增强和抑制细胞焦亡等药理学作用,为岩生忍冬的开发和利用提供数据支持和科学依据。基于单因素实验结果,采用响应面分析法(RSM)优化岩生忍冬黄酮提取工艺;分别建立二甲苯耳肿胀、角叉菜胶足跖肿胀、醋酸扭体反应和舔足反应等小鼠抗炎镇痛模型并评价其抗炎镇痛作用;建立小鼠环磷酰胺免疫抑制模型分析岩生忍冬黄酮对单核细胞碳廓清指数和血清免疫球蛋白IgA、IgM含量的影响;复制D-半乳糖小鼠慢性/亚急性衰老模型,通过检测肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)含量以评价岩生忍冬黄酮抗体内抗氧化作用;检测J774A.1小鼠单核巨噬细胞上清液中caspase-1、IL-1β和IL-18的水平,评价岩生忍冬黄酮对脂多糖+三磷酸腺苷(LPS+ATP)联合诱导小鼠单核巨噬细胞焦亡的影响,同时探讨其对cAMP-PKA信号通路的影响。岩生忍冬黄酮最佳提取工艺如下,提取温度65℃、乙醇浓度50%、提取时间60 min、料液比1∶25,黄酮实际得率为0.553%。响应面分析确定响应值与变异因素的多元二次回归方程模型:黄酮得率=0.61-0.48A+0.1B+0.029C-0.014D+0.32AB+0.04AC-0.012AD-0.02BC+0.037BD-0.031CD-0.058A2-0.068B2-0.069C2-0.057D2。岩生忍冬黄酮有效地抑制小鼠耳朵肿胀和足跖肿胀、减少小鼠醋酸扭体次数并延长小鼠热板舔足反应时间;岩生忍冬黄酮提升免疫抑制小鼠碳廓清指数,增强D-半乳糖衰老小鼠肝脏SOD和CAT抗氧化酶活性和降低MDA水平,同时有效降低巨噬细胞caspase-1、IL-1β和IL-18细胞因子水平并抑制巨噬细胞焦亡。上述结果表明,岩生忍冬黄酮具有良好的抗炎镇痛、免疫增强作用和抗氧化能力并通过增强cAMP-PKA信号途径抑制巨噬细胞焦亡,该研究结果能够为岩生忍冬的药理学研究及其开发利用奠定基础。

• 单位
  西南民族大学