疏肝补肾毓麟汤通过Keap1/Nrf2/GPX4通路抑制睾丸细胞铁死亡改善肝郁肾虚型少弱精子症小鼠的精子质量

作者：江晓翠; 萧闵; 赵敏; 刘祺; 姜兴宇; 吕银娟; 陈思易; 曹继刚^*

来源：中华中医药学刊, 2023, 1-17.

• 疏肝补肾毓麟汤
• 少弱精子症
• Keap1/Nrf2/GPX4
• 铁死亡
• 精子质量

目的 探讨疏肝补肾毓麟汤改善肝郁肾虚型少弱精子症小鼠生精功能和精子质量的作用及其可能机制。方法：60只雄性KM小鼠，随机分为空白组、模型组、疏肝补肾毓麟汤高、中、低剂量组和司他丁-1(Ferrostatin-1，Fer-1)组(Fer-1是铁死亡抑制剂)。除空白组外，其余组以1.25 g·kg-1腺嘌呤灌胃(intragastrical administration， ig.)+慢性束缚刺激构建肝郁肾虚型少弱精子症小鼠模型。给予相应药物干预后：精密天平称取小鼠体质量、睾丸质量、附睾质量计算睾丸指数、附睾指数；苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining， HE)染色观察睾丸组织病理变化并对睾丸生精功能进行评分；全自动精子分析仪检测精子密度和活动率；苯胺蓝染色法观察精子成熟度；布鲁斯蓝染色法观察睾丸组织铁沉积；免疫组化(Immunohistochemistry， IHC)检测睾丸组织谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione peroxidase 4， GPX4)、溶质载体家族7成员11(Recombinant Solute Carrier Family 7 Member 11， SLC7A11)蛋白表达；生化法检测睾丸组织超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase， SOD)、过氧化氢酶(Catalase， CAT)、丙二醛(malondialdehyde， MDA)；蛋白免疫印迹法(Western Blot， WB)检测睾丸组织Kelch-样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein-1， Keap1)、核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2， Nrf2)、GPX4、SLC7A11蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠睾丸指数、附睾指数、睾丸生精功能、精子密度及活动率、精子成熟度均显著下降(P＜0.05，P＜0.01)；经疏肝补肾毓麟汤及Fer-1干预后，上述指标均有显著改善(P＜0.05，P＜0.01)，且睾丸组织铁沉积显著降低，Keap1表达显著降低，Nrf2、SLC7A11、GPX4表达显著升高(P<0.05，P<0.01)。结论：疏肝补肾毓麟汤能明显改善肝郁肾虚型少弱精子症，其机制可能与调控Keap1/Nrf2/GPX4信号通路抑制睾丸细胞铁死亡有关。

• 单位
  基础医学院; 湖北省中医院; 湖北中医药大学