内源性促红细胞生成素对大鼠脱离视网膜光感受器细胞的保护作用

作者：解正高; 陈放; 庄朝荣; 王健; 华欣; 王虹; 季河清

来源：中华实验眼科杂志, 2011, 29(7): 605-609.

DOI：10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2011.07.007

• 促红细胞生成素
• 可溶性促红细胞生成素受体
• 视网膜脱离
• 光感受器细胞
• 神经保护作用

背景 促红细胞生成素(EPO)对多种视网膜疾病模型中视网膜神经元具有一定的保护作用,但EPO对视网膜脱离(RD)后光感受器细胞是否具有保护作用尚不清楚.目的 探讨内源性EPO对RD状态下光感受器细胞的保护作用及可能机制.方法 利用视网膜下腔注射质量分数1.4%透明质酸钠建立大鼠RD模型,按每组情况各组玻璃体腔内分别单次注射PBS或不同剂量的外源性可溶性EPO受体(EPOsR),采用计算机产生随机数字法将72只SD大鼠随机平均分为正常对照组、RD组、RD+PBS组、RD+EPOsR 2、20、200ng组.分别于造模后3d和14d用过量麻醉法处死大鼠并获得大鼠视网膜标本,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测光感受器细胞的凋亡情况,并分别采用Western blot和免疫荧光法检测视网膜中caspase-3的活性,RD造模后14d进行组织病理学检查并测量外核层(ONL)厚度.结果 RD造模后3d,RD组ONL出现凋亡细胞核,玻璃体腔注射EPOsR组光感受器细胞凋亡进一步增加,随着玻璃体腔注射EPOsR的剂量增加,ONL凋亡细胞核有增加趋势.Western blot和免疫荧光检测结果均显示,各组视网膜caspase-3表达的条带灰度值分别为(0.15±0.04)、(0.49±0.03)、(0.50±0.07)、(0.63±0.03)、(0.69±0.04)、(0.83±0.04),各组的总体差异有统计学意义(F=76.016,P=0.000),RD+EPOsR 200ng组的caspase-3活性均强于其他各组,差异均有统计学意义(P＜0.01).RD造模后14d,正常对照组、RD组、RD+PBS组、RD+EPOsR 2、20、200ng组的ONL厚度分别为(47.39±3.39)、(33.96±3.54)、(31.83±5.21)、(31.40±2.63)、(24.99±2.06)、(19.30±3.71)μm,总体差异有统计学意义(F=44.733;P=0.000);EPOsR处理组ONL厚度明显薄于单纯RD组和RD+PBS组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 RD状态下,EPOsR通过剂量依赖的方式诱导视网膜细胞的凋亡和caspase-3活性增强,而缺氧状态下视网膜神经上皮的内源性EPO表达增强可通过抑制caspase-3活性和抗凋亡作用发挥对光感受器细胞的保护作用.

• 单位
  扬州大学; 江苏省苏北人民医院