绿色荧光蛋白GFP在两种植物表达载体中的表达差异

作者：孙振琪; 王海娟; 岳建英; 赵倩倩; 杨向东; 周洪友; 赵明敏; 陈立红

来源：分子植物育种, 2023, 1-11.

• 绿色荧光蛋白
• 植物表达载体
• 本氏烟
• 瞬时表达

本研究以本氏烟草(Nicotiana benthamiana)为试验材料，分析了两种植物表达载体(pEAQ-HT-DEST3， pMDC32)背景下报告基因(绿色荧光蛋白基因， GFP)的荧光表达差异。根据GFP基因序列设计特异性引物，通过PCR扩增获得GFP基因。通过Gateway重组技术获得pEAQ-GFP和pMDC32-GFP表达载体，并进行了酶切鉴定和测序验证。为了研究GFP在两个表达载体pEAQ-HT-DEST3和pMDC32中的表达差异，将表达载体pMDC32-GFP和pEAQ-GFP转化到农杆菌C58C1后，注射接种到本氏烟叶片。结果表明，在不同载体中的GFP荧光表达明显不同。48 h后，注射pEAQ-GFP的烟草叶片荧光较强，而注射pMDC32-GFP的叶片上荧光较弱或无荧光。这一研究结果可以为GFP作为报告基因在植物遗传转化中的应用提供基础。

• 单位
  吉林省农业科学院; 内蒙古农业大学; 园艺与植物保护学院